Характерное для середины XVI в. стремление к прославлению русских государей путём их уподобления святым проявилось не только в «Книги степенной» и других памятниках письменности, но и в современных «Книге степенной» произведениях церковного искусства, изображающих как отдельных потомков Владимира, так и весь род русских государей, – в росписях Архангельского собора, на иконописном портрете Василия III Ивановича, на иконе «Благословенное воинство Царя Небесного». В «Книге степенной» впервые фиксируются рассказы и о святых некняжеского происхождения: о св. княгине Феодоре (глава 11 одиннадцатой степени), жене Нижегородского князя Андрея Константиновича, и о блаженном Галактионе Белозерском (глава 1 семнадцатой степени). Стремясь облегчить читателю знакомство с жизнеописаниями русских святых в «Книге степенной», составитель её Пространной редакции (рубеж XVI и XVII вв.) перед основным текстом поместил справочную статью «Новые чудотворцы», содержащую перечень рассказов о русских святых с указанием соответствующих разделов книги. На этом основании Дмитрий Сергеевич Лихачёв определил «Книгу степенную» как «путеводитель» по России XVI в., «святой и державной», путеводитель, «который сам является достопримечательностью и святыней», своего рода иконой «всех святых» Русского государства. Представленный в «Книге степенной» материал активно использовался в агиографии XVII в., в частности, при составлении Четьих Миней иеромонаха Германа (Тулупова) и Иоанна Милютина. «Книга степенная» относится к числу наиболее читавшихся памятников древнерусской книжности. О её популярности свидетельствует богатая рукописная традиция: в настоящее время исследователям известно не менее 145 списков последней четверти XVI – XVIII вв. Списки «Книги степенной» находились в библиотеках владимирского Успенского собора, Новоиерусалимского в честь Воскресения Христова, Кириллова Белозерского в честь Успения Пресвятой Богородицы, Антониева Сийского во имя Святойтроицы, и Димитриева Прилуцкого в честь Всемилостивого Спаса, Происхождения честных древ Креста Господня монастырей. Владельцами списков «Книги степенной» и её читателями были патриархи Никон и Адриан, Новгородский митрополит Иов, митрополит Рязанский и Муромский Иосиф, император Пётр I, царевич Алексей Петрович, дядя царицы Евдокии Лопухиной П.А. Лопухин, окольничие Алексей Тимофеевич Лихачёв, Богдан Фёдорович Полибин, Александр Петрович Протасьев, генерал-майор Григорий Петрович Чернышёв, Михаил Васильевич Ломоносов, Василий Никитич Татищев, Михаил Михайлович Щербатов и др. Также, по мнению исследователей, списками «Книги степенной» располагали патриарх Филарет (Романов) и царь Фёдор Алексеевич. Как следует из грамоты Казанского митрополита Ермогена св. патриарху Иову 1592 г., первый также был знаком с «Книгой степенной» (как полагают исследователи, с Чудовским списком). По мнению исследователей, по настоянию митрополита Ермогена на рубеже XVI и XVII вв. в этот список на листы 142, 751 и 760 внесли записи, содержащие сведения об истории Казанской епархии и о начале почитания святителя Гурия, первого архиепископа Казанского.