В последней из Итальянских войн (1551–1559 гг.) боевые действия велись как в Италии, так и в Лотарингии. В 1552 г. Генрих II по соглашению с Кёнигсбергским союзом протестантских князей вторгся в Лотарингию, захватил Мец, Туль и Верден. Карл V после нападения протестантов на его резиденцию был вынужден отвести свои войска от Пармы. В результате Парму удержал герцог Фарнезе, папе Юлию III пришлось подписать перемирие с французским королём и в дальнейшем соблюдать нейтралитет. В ходе поддержанного французами восстания из Сиены был изгнан испанский гарнизон (27–28 июля 1552 г.); Сиенская республика, владевшая важными портами на Тирренском море, фактически оказалась под французским протекторатом. Это стало поводом для вмешательства Флоренции. 2 августа 1554 г. в битве при Марчано армия французов и сиенцев была разгромлена, в апреле 1554 г. после осады капитулировал французский гарнизон в Сиене. В феврале 1556 г. в Воселе было заключено общее перемирие. К тому времени Карл V отрёкся от власти в Испании, Нидерландах и Италии в пользу своего сына Филиппа II. Итальянские войны завершились в 1559 г., уже после смерти Карла V. Согласно мирному договору, заключённому между Францией, Англией и Испанией в Като-Камбрези, Франция отказалась от всех претензий на Италию, удержав за собой маркизат Салуццо; Пьемонт и Савойя возвращались герцогу Савойскому; Милан и Неаполитанское королевство признавались владениями Испании. Кроме того, Франция получила от Англии (сначала временно, потом навсегда) Кале, а также три лотарингских епископства: Мец, Туль и Верден (формально эти епископства оставались землями Священной Римской империи, поскольку после отречения Карла V император в Итальянских войнах участия не принимал и мира в Като-Камбрези не подписывал). В начале XVI в. завоевательная политика турок-османов в Средиземном море и на Балканском полуострове приняла угрожающие масштабы. В 1516 г. турки захватили Алжир и Тлемсен (позднее город стал одной из пиратских баз в Средиземном море), в 1521 г. пал Белград, в 1522 г. был завоёван остров Родос. В 1526 г. в битве при Мохаче погиб король Венгрии и Чехии Людовик (Лайош) II, объединённые венгерские и чешские войска были разгромлены. Победа позволила туркам занять Среднедунайскую равнину и осадить в 1529 г. Вену; турецкие войска отступили только из-за наступивших холодов. Воспользовавшись перерывом в Итальянских войнах и добившись подписанием Нюрнбергского религиозного мира субсидии немецких князей, в 1532 г. Карл V предпринял поход против турок. Успех был скромен: императору удалось спасти от разграбления западно-венгерскую крепость Кёсег (Гюнс) и разбить арьергард турецкой армии в Штирии. После этого Карл V отправился в Испанию, предоставив руководство военными действиями брату, королю Фердинанду I.