По мнению исследователей, для организации школы и типографии нужен был год или полтора, поэтому создание Острожской академии следует отнести к 1576 или 1577 г., наиболее приемлемой датой следует считать коне 1576 г. В «Азбуке» школа именуется «детским училищем». Православные в официальных и неофициальных документах называли учебное заведение в Остроге школой или школами. Тимофей Аннич в 1584 г. подписывался как «дьяк школы русской Острозской». Несмотря на это, в конце 1570 гг. школу в Остроге считали высшим учебным заведением. Об этом свидетельствует завещание княжны Гальшки (Эльжбеты) Острожской от 16 марта 1579 г., в котором учебное заведение названо академией. В завещании Гальшки сказано, что 6 тыс. литовских грошей она отдаёт на госпиталь и на Острожскую академию, а также на Черчицкий монастырь Святого Спаса в селе Черчицы возле Луцка. Исследователи предполагают, что не только учителя, но и учащиеся Острожской школы привлекались к изданию «Острожской Библии», что свидетельствует о высоком уровне подготовки учеников. По мнению И.З. Мицко, Е.Н. Дзюбы и ряда других исследователей, изложенная в «Азбуке» 1578 г. информация даёт основание утверждать, что в Остроге была создана высшая школа. Т. Кемпа считает, что школа в Остроге давала начальное образование, позднее стала школой высшего типа. В отзывах современников-католиков об Острожской академии используется преимущественно название «греческий коллегиум» (в переписке папского нунция в Польше в 1581–1584 гг. Альберто Болоньетти; в сообщении секретаря папского нунция в Польше Орацио Спаннокки 1587 г.). Ипатий Потей в «Отписи на письмо некоего Клирика Острожского» (1599 г.) характеризует своего соперника как «ученика академии Острожской». О существовании православной академии в Остроге писал иезуит Ян Велевицкий в дневниковой записи 1623 г.: «Помещики этой местности были самыми активными покровителями греческих схизматиков. Поэтому и соорудили в этом городе схизматицкую академию как оплот своей религии». Симон Пекалид называл Острожскую академию «трёхъязычной гимназией», «трёхъязычным лицеем». В поэме «De bello Ostrogiano» («Про Острожскую войну») он писал о преподававшихся в Остроге «свободных науках», прославлял Острог как центр, где процветают культура и наука. Исследователи полагают, что подготовкой к созданию Острожской академии стало приглашение князем Константином Константиновичем Острожским в марте 1575 г. Ивана Фёдорова для организации типографии в Дерманском Свято-Троицком мужском монастыре (см. Святой Троицы женский монастырь в селе Дермань). В тот период началась работа над изданием «Острожской Библии», сложился кружок учёных-богословов. Первые этапы этого труда могли осуществляться в Дерманском монастыре или в городе Дубно (ныне Ровненской области, Украина), где в 1576 г. преимущественно находился князь К.К. Острожский. Православный магнат деятельно участвовал в организации Острожской академии. В феврале 1585 г. он дал фундуш на нужды церкви Святой Троицы и госпиталя в Остроге – доходы от города Сураж (ныне Тернопольской области, Украина; владение князя К.К. Острожского с 1583 г.) и сёл Суражской волости: Старый Сураж, Турова, Онишковцы, Ходаки, Ближние и Дальние Зеньки, Исерна и Тетерев. Позже отдельным актом (не сохранился) часть доходов от Суражской волости князь передал на содержание Острожской школы.