19 декабря члены комиссии в присутствии казначея иеромонаха Тихона произвели «без всяких инцидентов» опись и опечатали всё монастырское имущество (Государственный архив Воронежской области). Постановлением уездной комиссии 23–24 декабря того же года братия была выселена из монастыря. 25 декабря «для распределения всего остального имущества и зданий» в обитель выехала специальная комиссия, включавшая экспертов-художников. У Задонского монастыря изъяли 26 фунтов 14 золотников церковного серебра (Государственный архив Воронежской области), множество реликвий и предметов утвари XVIII – начала XX вв. (Государственный архив Воронежской области). Местонахождение святынь, в том числе и чтимой копии иконы святителя Тихона, написанной после обретения мощей, исследователям неизвестно. 24 марта 1921 г. Задонский монастырь был окончательно закрыт (Государственный архив Липецкой области). Решение, принятое Задонским УИК, утвердил президиум Воронежского губисполкома (Государственный архив Воронежской области). На территории Задонского монастыря кроме военного лазарета, совхоза и приюта разместили концентрационный лагерь на 500 человек «с целью разгрузки губернских концлагерей». В 1922 г. в Задонском монастыре была детская колония, в которой к 1923 г. содержалось 113 человек. С 1929 г. на территории Задонского монастыря располагался «детский городок». По ходатайству Задонского РИК были разобраны некоторые постройки Задонского монастыря, стройматериалы использовались для строительства нового здания Каменской профшколы. В 1940 гг. помещения Задонского монастыря занимали госпиталь и школа военной разведки, в 1950–1960 гг. – Задонский психоневрологический интернат. В перестроенном Троицком соборе находились кинозал для больных, медицинские учреждения, столовая и кухня, на сохранившемся первом ярусе колокольни – сушилка. Угловые башни были снесены до уровня ограды, трапезная, старый настоятельский корпус и деревянный Тихоновский храм разобраны. В северо-западной части территории у ограды были построены двухэтажный больничный корпус и другие здания. Часть надгробий с уничтоженного монастырского кладбища использовалась при закладке фундаментов новых построек. Одно из надгробий, высеченное из белого камня в виде аналоя с лежащими на нём крестом и Евангелием, было оштукатурено и приспособлено под постамент для бюста Владимира Ильича Ульянова (Ленина). После 1989 г. Задонский психоневрологический интернат был переведён в построенный рядом медицинский комплекс. В 1920–1980 гг. паломничество к источнику святителя Тихона не прекращалось, несмотря на снос часовни, корпусов и купели и даже оцепление пикетами милиции.