К началу 1881 г. в общине были открыты больница, иконописная школа, ковровая и башмачная мастерские, в десяти корпусах проживало больше 260 сестёр. 14 ноября 1881 г. Казанская община была преобразована в общежительный монастырь с возведением монахини Досифеи (1 января 1882 г.) в сан игуменьи. 9 марта 1882 г. несколько сестёр приняли монашеский постриг. Основной благотворитель Вышневолоцкого монастыря А.С. Путятин после кончины в декабре 1882 г. был похоронен на монастырском кладбище. В списке попечителей обители, поданном 23 июня 1885 г. игуменьей Досифеей Тверскому архиепископу Савве (Тихомирову), упомянуты купцы Н.В. Салтыков (пожертвовал 25 тыс. руб.), М.И. Пожарский (10 тыс. руб.), П.Н. Николаев (9 тыс. руб.), А.Ф. Платонов (9 тыс. руб.), В.И. Кожевников (5 тыс. руб.), купчихи А.А. Попова (пожертвовала 25 тыс. руб.), П.И. Андреева (12 тыс. руб.), А.Е. Гагарина (4 тыс. руб.), почётные граждане И.И. Стахиев (10 тыс. руб.) и М.Д. Иванова (3 тыс. руб.). Вышневолоцкий монастырь посещали Ионанн Кронштадтский, император Александр III, великий князь Константин Константинович, великий князь Владимир Александрович. В конце 1870 – 1880 гг. в Вышневолоцком монастыре велось каменное строительство на средства купцов Е.Н. Сивохина и Г.Г. Германова. По проекту архитектора Александра Степановича Каминского был построен холодный Казанский собор, освящённый 8 августа 1882 г. архиепископом Тверским Саввой (Тихомировым). Санкт-Петербургский митрополит Исидор (Никольский) пожаловал облачения и книги. В соборе хранились икона Божьей Матери «Скоропослушница», написанная на Афоне, образ Серафима Саровского с частицей его мантии, частица камня от Гроба Господня, переданная в мае 1890 г. Иерусалимским патриархом Никодимом I, ковчег с частицами мощей святителей Иоанна Златоуста, Григория Богослова, великомученика Пантелеимона, мучеников Ермолая и Игнатия, мучениц Фотинии, Евфимии. На средства купца В.А. Китайцева Казанская часовня была перестроена в загородную церковь монастыря и освящена в июне 1880 г. епископом Саввой (Тихомировым). Слева от царских врат в позолоченном киоте с сенью находилась чудотворная Казанская икона. В 1883–1887 гг. была построена колокольня, на втором этаже которой 28 января 1888 г. епископом Саввой освящена церковь во имя Ефрема Сирина и мученицы Неонилы. Впоследствии Сивохины были похоронены в усыпальнице под храмом. В храме находились написанные на Афоне иконы «Отрада и Утешение», великомученика Георгия и великомученика Пантелеимона. В двухэтажном больничном корпусе 27 мая 1890 г. был освящён храм во имя пророка Илии и великомученика Пантелеимона.