В период строительства часовни (1716 г.) жители решили возвести для иконы церковь (впоследствии соборный храм Житина Осташковского монастыря). Чудотворный Смоленский образ находился в Смоленском храме слева от царских врат. В 1771 г., при строителе Амвросии (Потёмкине) и казначее иеромонахе Левкии, на «сборные деньги» икона была украшена серебряным вызолоченным чеканным окладом, жемчужным убрусом. В XIX в. образ был «утвержден в большой дске, длиною в 2 аршина и 5 вершков, шириною в 1 аршин и 2 вершка, с изображениями вверху Св. Троицы, а внизу разных святых». В 1853 г. был выполнен новый серебряный чеканный оклад весом 22 фунта 3 золотника. Согласно описанию начала XX в., длина иконы «с малым киотом» составляла 14 вершков, ширина – 10. Другая чтимая икона, список чудотворного образа, находилась слева от царских врат у придела во имя Трёх святителей. Украшавший икону серебряный вызолоченный оклад (по мнению исследователей, конца XVII в.) находился на чудотворной иконе до 1771 г. По описанию начала XX в., «весь оклад обронный; поля или каймы его обведены с обоих краёв (и дальнего, прилегающего к киоту, и ближнего, смежного с изображением) двумя параллельно идущими рубчиками, из коих дальний потолще, а ближний потоньше, что даёт полям оклада вид рамки; венец на Богоматери сверху украшен двумя с краёв рельефными ангелами и несколькими в средине шестикрыльными херувимами, прорезной работы. Риза наложена на икону уже после устроения оклада полей» (Государственный архив Тверской области). В трапезе Иоанно-Богословской церкви находилась «ветхая» икона Святой Троицы (длина 2 аршина и 2 вершка, ширина аршин и 9 вершков), согласно надписи пожертвованная в 1717 г. Среди церковной утвари исследователи находят примечательными: серебряный вызолоченный чеканный крест с частицами мощей, переданный в 1717 г. настоятелем переславль-залесского Горицкого монастыря архимандритом Пахомием; серебряное кадило (1 фунт 50 золотников), вклад священника П. Леонтиева; несколько серебряных богослужебных сосудов, вклад XVIII в. монаха Антония, а также «по обещанию» иеромонаха Амвросия (Потёмкина). В ризнице хранилось множество богатых облачений, в том числе золотого глазета, золотосеребряной парчи и др. В храмовый праздник в честь Смоленской иконы Божьей Матери 28 июля в Житином Осташковском монастыре совершался крестный ход из всех церквей Осташкова (Государственный архив Тверской области).