В 1522 г. в Димитриевом монастыре принял постриг Игнатий Вологодский (князь Иван Андреевич Угличский), при игумене Афанасии (1539–1546 гг.) – Феодосий Тотемский. В Димитриевом монастыре на покое жили митрополит Сарский и Подонский Иона (Архангельский), архиепископ Вологодский и Белозерский Симон, погребены на монастырском кладбище. В 1654 г. в Димитриевом монастыре проживали архимандрит, келарь, казначей, шесть иеромонахов, два иеродиакона, два диакона, тридцать один «старец»-монах; монахи жили также в монастырских сёлах и на соляных промыслах. В 1675 г. было 50 насельников (архимандрит, келарь, казначей, три иеромонаха, два иеродиакона, сорок два монаха), в 1693 г. – 66 насельников, в том числе «конюшенный», «житный», «хлебодар», «больничный», «поваренный», «воротный». В период реформ Петра I кроме братии в монастыре проживало до 20 отставных солдат. В 1727 г. в Димитриевом монастыре было 65 насельников. В течение первой половины XVIII в. братия сократилась: с 52 человек в 1735 г. до 37 в 1738 г. С 1764 г. Димитриеву монастырю полагалось по штату до 17 монахов. В ХIХ–ХХ вв. в монастыре подвизались 10–12 монашествующих, до 20 человек послушников и «служителей», в 1895 г. было девять насельников (архимандрит, шесть иеромонахов, иеродиакон, монах). По данным «Ведомости о средствах содержания Спасо-Прилуцкого монастыря» 1918 г., в нём проживало 15 насельников (архимандрит Нифонт (Курсин), три иеромонаха, три иеродиакона, четыре послушника и четыре послушника на испытании). Димитриев монастырь уже при Димитрии владел земельными угодьями. В «Житии» упоминается монастырское поле в двух верстах от обители, где монастырские работники (вероятно, нанятые монастырём «делатели») выращивали хлеб. Владения Димитриева монастыря формировались за счёт приобретений и вкладов, о чём свидетельствуют самые ранние грамоты на землю – купчая 1420 – начала 1450 гг. на пустошь Сивцевскую в Оларевской слободке и грамота 1449 г. Демида Васильева на пустошь Кубцовскую в Городском стане. По данным окладной книги 1598 г., монастырскую вотчину составляли шесть сёл и 61 деревня с 255 дворами. К началу XVII в. владения Димитриева монастыря располагались в девяти волостях Вологодского, Тотемского уездов, а также в Радонежской волости Московского уезда (село Яуртово). Поступления в монастырь ржи, овса, пшеницы и ячменя вместе с остатками минувшего года в 1650/1651 г. составили более 3700 пудов. К 1764 г. за монастырём числилось девять сёл, четыре сельца и 88 деревень – всего 632 двора с 2819 жителями мужского пола. Наряду с землями с первой половины XV в. Димитриев монастырь владел и промысловыми угодьями. В 1471/1472 г. князь Андрей Васильевич Вологодский дал подтвердительную жалованную грамоту на монастырские рыбные ловли, сенные покосы, лесные угодья на реке Сухоне в Комельской волости, на реке и озере Лоста в Лоскомской волости и на приобретенные ранее деревни. В XVI–ХVII вв. великие князья и цари кроме пожалований земли предоставляли монастырю различные льготы, которые способствовали развитию хозяйства.